利用碱性磷酸酶(ALP)对磷酸基团的水解性质和λ核酸外切酶(λexo)对含有磷酸修饰核酸底物的降解能力,以氧化石墨烯纳米片(GO)为信号放大元件,建立了荧光偏振分析方法用于碱性磷酸酶活性的测定方法。研究了不同浓度ALP引起体系荧光偏振值变化的规律,对ALP的反应时间、λexo的用量和反应时间,GO的浓度和反应时间进行了考察。结果表明:在优化的实验条件下,ALP浓度在0.05~60 U/L范围时,其浓度对数与荧光偏振信号FP值呈良好线性关系,检出限为0.05 U/L。方法已用于牛血清和市中心湖水样品中ALP的测定。