基于氧化石墨烯的磺胺嘧啶核酸适配体的筛选与鉴定

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单位重庆师范大学生命科学学院;
来源重庆师范大学学报(自然科学版)
出版年2021
期号02
摘要
【目的】利用GO-SELEX方法对磺胺嘧啶(Sulfadiazine)核酸适配体进行筛选与鉴定。【方法】基于氧化石墨烯(Graphene oxide)与ssDNA的π-π堆积作用,将氧化石墨烯作为结合ssDNA与分离的介质,以磺胺嘧啶为靶标分子,利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX)和磁分离技术建立了基于氧化石墨烯的核酸适配体筛选方法 GO-SELEX,对筛选产物测序所得的核酸序列进行了同源性分析和二级结构预测,亲和力和特异性分析以及方法学考察。【结果】经过9轮筛选,获得了对磺胺嘧啶具有较高亲和力(K_d=411nmol·L~(-1))的核酸适配体Ap-41,且Ap-41对磺胺嘧啶的特异性良好;磺胺嘧啶质量浓度在1.0~40μg·mL~(-1)范围内与荧光强度的线性关系良好,检出限为0.029μg·mL~(-1),水样中加标回收率范围为95.0%~104.0%,相对标准偏差不超过6.1%。【结论】基于核酸适配体Ap-41的检测方法灵敏度较高,可用于后续传感器的构建及实际样品中磺胺嘧啶的检测。

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