分别采用三种不同发射波长的荧光染料,通过共价偶联的方式分别标记三种流感病毒亚型H1N1、H5N1和H9N2的抗体,再利用氧化石墨烯猝灭所标记染料的荧光。当将荧光标记抗体和氧化石墨烯一并加入到流感病毒溶液中时,由于抗原和抗体之间的特异性相互作用,病毒会和抗体作用而使得氧化石墨烯远离荧光染料,染料的荧光得以恢复。通过恢复的荧光发射波长位置和荧光强度,可以定性和定量检测三种不同的流感病毒亚型。在最佳实验条件下,对三种流感病毒亚型H1N1、H5N1和H9N2进行同时检测,H1N1的检出限为0.48ng/mL,线性范围为1~18ng/mL;H5N1的检出限为0.46ng/mL,线性范围为1~18.5ng/mL;H9N2的检出限为0.42ng/mL,线性范围为1~16ng/mL。该方法具有较好的稳定性、重现性和灵敏度,可实现多个流感病毒亚型的分型和同时检测。