聚乙烯亚胺修饰的铁酸镍-氧化石墨烯复合物在磷酸化多肽富集中的应用摘要
制备了一种聚乙烯亚胺(PEI)修饰的铁酸镍-氧化石墨烯复合物材料GO@PEI-NiFe_2O_4,用于选择性净化和富集生物样品中的磷酸化肽段。此复合材料表面的Ni~(2+)和Fe~(3+)可与磷酸基团配位,从而选择性地吸附磷酸化肽段,修饰的PEI增强了复合材料的亲水性,有利于其与磷酸化肽段结合。此外,复合材料中的NiFe_2O_4具有磁性,可使其快速从溶液中分离出来。以β-酪蛋白(β-Casein)为样品,考察了复合材料对胰酶酶解液中的磷酸化肽段的富集性能,并与GO@NiFe_2O_4(未被PEI修饰)富集的结果进行了比较,同时探讨了复合材料的吸附机理。采用磷酸化肽段pTyr测定了复合材料对p Tyr的静态和动态吸附曲线,最大吸附容量可达36.2μg/mg。研究结果表明,此复合材料能够有效去除非磷酸化肽段等干扰组分的影响,高效地富集复杂基体中的磷酸化肽段。大鼠肝脏蛋白胰酶酶解液经过富集后,采用质谱可鉴定出1535条磷酸化肽段,其富集效果显著优于Fe~(3+)-IMAC商品化试剂盒。本研究为磷酸化肽段的富集提供了一种高选择性材料,在磷酸化蛋白质组学研究中具有潜在的应用前景。
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