基于荧光共轭聚合物和氧化石墨烯的核酸外切酶I检测

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单位南阳师范学院化学与制药工程学院;南阳理工学院生物与化学工程学院;
来源分析试验室
出版年2024
期号04
摘要
核酸外切酶I(Exo I)作为一种重要的核酶参与了许多生物学过程,具有维持遗传信息稳定性的功能,因此建立有效检测Exo I活性的方法具有重要的研究价值。基于聚芴类荧光共轭聚合物-poly[(9,9-bis(6′-N,N,N-trimethyl-ammonium)hexyl)-fluorenylene phenylene dibromide](PFP)不能与吸附在氧化石墨烯(GO)表面的单链DNA结合的实验发现,借助GO对单链DNA和双链DNA作用力强度大小的差异,构建了一个背景信号低、灵敏度高的Exo I检测新方法。GO和PFP的最适浓度分别为2.5和7.2 mg/L。在最佳条件下,Exo I浓度在0.5~4.0 U/mL范围内与体系的荧光强度呈良好的线性关系,线性方程为F=-0.11c+0.861,检出限为0.16 U/mL。该方法可用于血清模拟样品中Exo I活性的检测,加标回收率为103.6%~106.0%。

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