青霉素G酰化酶E.C.3.5.1.11(以下简称PGA)可催化青霉素G钾盐水解生成6-氨基青霉素烷酸(6-APA),且具有反应条件温和、催化效率高、专一性较强等优点,显示了广阔的应用前景。但PGA的环境耐受性差,易受温度、pH和金属离子等物理化学因素的影响,加之游离PGA难以从反应体系中分离,增加了6-APA的生产成本。将PGA固定化到载体表面可有效改善PGA的环境耐受性,提高其可回收性,从而提高PGA的重复使用性,并降低6-APA的生产成本。但PGA固定化存在的问题,诸如:固定化后活力降低,载体对PGA的负载量与响应速率和回收率之间的trade-off效应等,成为阻碍固定化PGA应用的瓶颈。针对这一问题,本课题组基于从头设计的理念出发,首先通过测定游离PGA在含不同功能基的有机溶剂中的催化活性,形成了维持PGA高催化活性的微环境实践经验和理论初识,并在此基础上,通过逐步深入的研究方法,设计合成出有利于维持PGA微环境的磁性复合温敏性嵌段共聚物载体,所合成载体固定化PGA的酶活力为32927 U/g,相对于游离PGA的获利比例为93.48%,PGA在载体上的负载量为136.42 mg/g,固定化PGA在重复使用12次后酶活保留率高达85%。该载体能够利用温敏性聚合物嵌段PDEA的溶胶/凝胶转变,实现载体在溶胶状态下PGA的固定化和对PG的催化转化,在凝胶状态下的磁性分离回收,不仅有效提高了PGA催化活性,而且实现了其负载量与响应速率和回收率间的有效平衡。