干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后化学发光成像摘要
目的:树鼩脐带间充质干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后是否成功通常用小动物活体成像仪观察,但活体成像仪价格昂贵,我们尝试用化学发光成像的方法观察。方法:用CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒转染树鼩脐带间充质干细胞,用最适浓度的嘌呤霉素筛选,存活的细胞用6孔板的3个孔培养,贴壁后,3个孔依次加入底物D-荧光素钾盐,用化学发光成像仪拍照,再用软件进行活体成像转换。将转染成功的细胞注入麻醉后的树鼩皮下,树鼩静脉注射底物。结果:细胞加入底物后有生物发光,发光强度随底物作用时间延长而减弱。树鼩皮下也观察到发光细胞。结论:C MV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒能成功转染树鼩脐带间充质干细胞,转染成功的细胞用于动物模型治疗后,可进行活体成像,观察细胞在动物体内的分布。
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