两种色型豌豆蚜胞内共生菌研究摘要
豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)属于半翅目蚜科,是世界范围内豆科作物及牧草的主要害虫,有红、绿两种生物性。绿色型豌豆蚜在我国分布广泛,且危害严重,而红色型目前仅在我国西部地区分布,且种群数量具有明显的增加趋势。本文研究巴克纳氏(Buchner)共生菌对两种色型豌豆蚜生长发育和种群参数的影响、两种色型豌豆蚜脱共生菌过程中体内物质含量及转氨酶活性动态变化,为更好的明确两种色型豌豆蚜种群消长动态、降低其对豆科作物及牧草的危害提供理论依据,主要研究结果如下:1.抗生素对两种色型豌豆蚜生长发育和繁殖的影响将0.2%的6种抗生素(利福平、盐酸金霉素、氯霉素、盐酸土霉素、青霉素G钾盐和硫酸链霉素)分别按同时喷洒蚕豆植株和蚜虫虫体、只喷洒蚜虫虫体和只喷洒蚕豆植株3种方式处理,获得各种处理的发育历期、平均体重、体质量差、相对日均体质量增长率和平均产蚜量等生物学参数。结果表明:3种处理方式对两种色型豌豆蚜生长发育和繁殖影响的大小顺序为:同时喷洒植株和虫体处理>喷洒植株表面的处理>喷洒虫体处理;6种抗生素对两种色型豌豆蚜生长发育和繁殖影响的大小顺序为:利福平>盐酸土霉素>盐酸金霉素>硫酸链霉素>氯霉素>青霉素G K盐;6种抗生素经过3种不同处理方式,对两种色型豌豆蚜生长发育和繁殖影响表现为:延长发育历期,体重减轻,繁殖力下降;不同抗生素和不同处理方式对两种色型豌豆蚜生长发育和繁殖影响较大的4种组合处理顺序为:利福平同时喷洒植株和虫体处理>利福平喷洒植株处理>利福平喷洒虫体处理>土霉素同时喷洒植株和虫体处理。2.利福平3种处理方式对两种色型豌豆蚜种群参数的影响利福平3种处理后,2种色型豌豆蚜种群净生殖率下降,平均世代周期延长,内禀增长率和周限增长率增加,种群加倍时间延长,且对种群净生殖率、平均世代周期、内禀增长率、周限增长率和种群加倍时间的影响与同色型对照差异显著。利福平3种处理对红色型和绿色型种群净生殖率、内禀增长率和种群加倍时间的影响与同色型对照差异显著。3.两种色型豌豆蚜脱共生菌利福平浓度筛选利福平植株内吸处理试验结果表明:随着利福平浓度的逐渐增大,两种色型豌豆蚜若蚜死亡率增大,世代历期缩短,繁殖力下降,成蚜体重减轻。根据蚜虫脱共生菌后的生物学参数变化,最终选择豌豆蚜脱共生菌的利福平浓度为0.2mg/ml。4.两种色型豌豆蚜脱共生菌鉴定用0.2mg/ml的6种抗生素(利福平、盐酸金霉素、氯霉素、盐酸土霉素、青霉素g钾盐和硫酸链霉素)溶液150ml进行植物内吸处理,分别在第6d和第11d取样进行豌豆蚜脱共生菌鉴定,通过分子鉴定和光学显微观察结果表明,经过6种抗生素处理后在第6d时,都不能脱掉两种色型豌豆蚜体内的buchner菌;经利福平和土霉素处理后在第11d时,两种色型豌豆蚜体内的buchner菌被脱掉。5.两种色型豌豆蚜脱共生菌过程中体内物质含量的动态变化用0.2mg/ml利福平溶液进行豌豆蚜脱共生菌处理,处理后两种色型豌豆蚜单头蚜虫蛋白含量在第4、6、8、10和12d显著低于同色型对照;处理后两种色型豌豆蚜单头可溶性糖含量第6、8、10和12d显著低于同色型对照;处理后红色型豌豆蚜单头糖原含量在第2、6、8、10和12d显著低于同色型对照,而绿色型单头蚜虫糖原含量在第6、8、10和12d显著低于对照,第2d显著高于对照;处理后两种色型豌豆蚜单头蚜虫总脂肪含量在第2d低于同色型对照,而在第4、6、8、10和12d高于同色型对照,红色型在第8d总脂肪含量与对照差异显著,而绿色型在第12d总脂肪含量与对照差异显著;处理后两种色型豌豆蚜中性脂肪含量在第2、4、6、8和10d高于同色型对照,而中性脂肪含量在第12d低于同色型对照。从物质含量角度出发,豌豆蚜脱共生菌过程是碳水化合物和蛋白质含量下降,总脂肪和中性脂肪含量升高的过程。6.两种色型豌豆蚜脱共生菌处理后能量变化用0.2mg/ml利福平溶液处理豌豆蚜后,在第8d时计算体内物质储存能量变化表明:处理后豌豆蚜体内蛋白质、可溶性糖和糖原所储存的能量显著低于同色型对照;处理后豌豆蚜体内总脂肪所储存的能量高于同色型对照,但差异不显著;处理后两种色型豌豆蚜体内总能量显著低于同色型对照。7.豌豆蚜脱共生菌过程中体内转氨酶活性动态变化研究结果表明:用0.2mg/ml利福平脱共生菌处理后,绿色型豌豆蚜谷草转氨酶(ast)活性与对照相比,第2、4、6和8d的ast酶活性高于对照,而第10和12d的处理ast酶活性低于对照;红色型ast酶活性表现为:处理后,第2、10和12d的AST酶活高于对照,其余测定时间AST酶活处理低于对照;绿色型谷丙转氨酶(ALT)酶活性只有第6d对照高于处理,其余测定时间都是对照低于处理。而红色型豌豆蚜ALT酶活性第2和4d时,对照高于处理,其余测定时间都是对照低于处理;处理后两种色型豌豆蚜谷氨酰胺合成酶(GS)酶活性都表现为:第2、4和6d都是处理高于对照,而从第8d开始,对照和处理酶活性出现交替上升变化。
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