目的通过多次酶消化的方式获取新生24小时大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarialosteoblasts, ROB),并以其为研究模型,观察常氧条件下不同浓度的红景天苷(salidroside, SAL)对成骨细胞增殖、分化和矿化的调控作用,并对其可能的作用机制进行了初步探讨,同时还观察了SAL对成骨细胞低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1alpha, HIF-1α)及其下游靶基因血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor, VEGF)的调控作用。方法1利用酶消化的方式获取ROB细胞,通过差速贴壁法纯化ROB细胞,经过活细胞形态学的观察、碱性磷酸酶Gomori钙-钴法染色及矿化结节茜素红染色法来鉴定ROB细胞,取第三代纯化度达90%以上者用于实验。2利用MTS法检测ROB细胞的增殖活性。3利用磷酸苯二钠法,使用碱性磷酸酶(alkalinephosphatase, ALP)试剂盒测定SAL对成骨细胞早期分化的标志性基因ALP活性的影响。4利用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chainreaction, RT-PCR)法检测成骨细胞晚期分化的标志性基因骨钙素(osteocalcin,OC)、成骨细胞特异性转录因子Osterix(Osx)和Runx2及HIF-1α、VEGF的mRNA表达水平。5利用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immnosorbent assay,ELISA)测定OC、VEGF及成骨细胞早、中期分化的标志性基因I型胶原(Collagen Type1, Col-1)的分泌水平。6利用茜素红染色和定量分析法检测SAL对ROB矿化功能的影响。结果1获取的ROB细胞经Gomori钙-钴法染色后胞质内有灰黑色的颗粒及块状沉淀出现。ROB细胞经不传代培养13天可形成矿化结节,在倒置显微镜下观察呈黑色不透明区,其经茜素红染色后呈现红色。2SAL可显著促进ROB细胞增殖。3SAL能显著增加ROB细胞中ALP、Col-1及OC的含量促进细胞分化成熟。4SAL能够促进ROB细胞矿化形成矿化结节。5SAL能显著促进成骨细胞分化的特异性转录因子Oterix和Runx2的mRNA转录水平增高。6SAL能上调HIF-1α及其下游靶基因VEGF的表达。结论SAL可以促进ROB细胞增殖、分化及矿化;上述作用可能与SAL上调成骨细胞特异性转录因子Oterix和Runx2的mRNA转录水平及激活HIF-1α和VEGF相关。