目的:建立肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,Kp)肺部感染小鼠模型,采用高效液相色谱(HPLC)法测定不同剂量左氧氟沙星(levofloxacin,LVF)在其体内的药动学参数。方法:血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,采用Diamosail-C18色谱柱分离,流动相为乙腈(0.05 mol·L-1)-磷酸二氢钾(17∶83),磷酸二氢钾盐溶液以磷酸调整pH为3.0左右,流速为1 mL·min-1;检测波长为295 nm。结果:LVF在0.312 mg·L-1内线性关系良好;方法的日间和日内精密度均小于7.2%,稳定性良好。Kp肺部感染小鼠口服LVF15,30,60和90 mg·kg-1后,LVF的PK参数tmax、t1/2、CL/F和Vd/F均无显著性差异(P>0.05)。结论:所建立的HPLC分析方法准确、灵敏、专属性强、重复性高,适用于肺炎克雷伯菌肺部感染小鼠体内的左氧氟沙星药动学研究。